细胞冻存液的保存条件是什么?
更新时间:2023-05-11 点击次数:1102次
细胞冻存是一种常见的细胞保存方法,涉及将细胞在低温下冷冻保存以延长其寿命。
1、冻存液的配制
配制通常包括三种核心成分:凝血酸钠、DMSO和细胞培养基。其中凝血酸钠的浓度应为2.5g/L,DMSO的浓度应为10%(/v),而细胞培养基的组成则根据需要进行调整。
2、细胞的收集和处理
在进行细胞冻存之前,需要确保细胞处于最佳状态。这通常包括在合适的生长条件下培养细胞,并确保它们处于对数生长期。在冻存之前,需要用无菌PBS或胰酶等化学物质将细胞从培养瓶中剥离并洗涤。
![//www.ukelale.com/Products-35942866.html](https://img68.chem17.com/9/20230511/638193996273332548567.jpg)
3、冻存管的选择
选择合适的冻存管也很重要。一般来说,推荐使用聚丙烯酸(PP)管,因为它们具有较高的耐冻性,并且不会导致细胞损伤。
4、冷冻过程
在将细胞放入冻存管之前,需要将其预先冷藏至4℃。然后,将细胞和冻存液混合在一起,并将混合物缓慢地加入冻存管中。随着混合物的添加,可以使用差压管来从管中抽出空气,以防止产生气泡影响冷冻效果。最后,在-80℃或液氮中快速冷冻样品。
5、保存条件
一旦细胞成功冻存,它们应当存储在-80℃或液氮中。若使用液氮,则需确保标签明确容器的身份,并严格控制其温度以避免液氮瓶内压力升高,打开时造成安全问题。
总而言之,细胞冻存是一种有效的细胞保存方法,但需要遵循正确的配制、处理和保存条件才能保证成功。只有在正确执行了上述步骤后,才能确保细胞在保存期间不受到任何质量损失。