cck8细胞增殖检测试剂盒的原理是什么?
更新时间:2023-10-13 点击次数:3263次
cck8细胞增殖检测试剂盒是一种常用于评估细胞增殖和生存能力的试剂。它基于双氮唑黄(WST-8)的化学反应原理。WST-8是一种水溶性二硫苏糖盐,当与电子传递介质1-甲基四氢唑硫代甘汞(MTS)混合时,可以通过细胞内还原酶的活性来检测细胞数量。
在
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中,WST-8与MTS以及一种电子传递介质PMS(邻苯二酚硫酸盐)混合。当此混合物加入到细胞培养体系中时,细胞内的还原酶(如脱氢酶等)会将WST-8还原成形成橙色产物的可溶性荧光物。这个橙色产物的量与细胞数量成正比。
在实验中,将待测的细胞接种在培养皿或孔板中,并进行不同处理组和对照组。接下来,将CCK-8试剂加入每个孔中,并进一步孵育一段时间,使细胞内的还原酶与试剂发生反应。在反应结束后,通过测量溶液中产生的橙色产物吸光度的变化,可以间接地评估细胞数量。
![cck8细胞增殖检测试剂盒](https://img50.chem17.com/9/20231013/638327991241001085324.png)
使用吸光度检测仪器,以450纳米作为测试波长,测量样品的吸光度值。吸光度值的增加与细胞数量的增加成正比。通常,吸光度值越高,说明细胞数量越多,代表细胞增殖能力较强;相反,吸光度值较低则表示细胞数量较少,代表细胞增殖能力较弱。
总结起来,
cck8细胞增殖检测试剂盒利用细胞内的还原酶活性将WST-8还原成可溶性荧光物,通过测量荧光物的吸光度变化,间接评估细胞数量,从而达到评估细胞增殖和生存能力的目的。这种方法简便、快速,广泛应用于细胞生物学和药理学研究中。